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蛋白質微陣列

構建蛋白質陣列文庫的第一步是建立全長cDNA表達文庫,再將cDNA文庫轉化成蛋白質文庫。

原則上所有cDNA都可以用於蛋白質文庫的構建,然而大多數蛋白質因不具備體外可檢測的生物活性,因而不適於文庫篩選。

目前能適用於體外高通量功能篩選的蛋白質主要有細胞膜「表面蛋白」和「分泌型蛋白」。

大部分分泌型蛋白質在氨基末端含有20至40個胺基酸的信號肽。而膜蛋白均含有跨膜疏水性的α螺旋結構。

利用電腦程式可以預測這兩類蛋白,從而挑選相應的cDNA構建蛋白質陣列文庫。

一旦cDNA文庫確定後,可將cDNA克隆到表達標記蛋白的載體內,應用高通量自動化的蛋白表達系統來表達和純化帶有標記的靶蛋白。

關鍵字: #蛋白質 #陣列